細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

PLC/PRF/5細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持PLC/PRF/5細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 PLC/PRF/5細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于PLC/PRF/5 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                         445ml

特級胎牛血清                           50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

植物25羥基D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒

Human ai endomysial aibody IgA (EMA IgA) ELISA Kit 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)試劑盒

PorcineIerferonα,IFN-αELISAKit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒分裝

ADVIgM腺病毒IgM混合型(間接法二步法)

血液合成酶總活性比色法定量試劑盒20次

Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISAKit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒

大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)試劑盒 ，英文名： SFRP2 ELISA Kit

Rat beta thromboglobulin / beta thrombus protein (beta -TG) ELISA Kit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒

RatIerleukin9,IL-9ELISAKIT 大鼠白介素9(IL-9)試劑盒分裝

CLIAKitforDPPIV(MousedipeptidylpeptldaseIV)ELISAKit小鼠二肽基肽酶Ⅳ

細(xì)胞茜素紅(ALIZARIEDS)鈣染色試劑盒50次

Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒

載脂蛋白B（ApoB）測定試劑盒（免疫比濁法）

載脂蛋白A-I（ApoA-I）測定試劑盒（免疫比濁法）

銅（Cu）測定試劑盒（絡(luò)合比色法）

α-巖藻糖苷酶（AFU）測定試劑盒（速率法）

PE-Cy7標(biāo)記人CD44單克隆抗體

G蛋白偶聯(lián)受體C5L2蛋白抗體

DDR2重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白  Protein

Klf4 (Kruppel likefactor 4 0.5mgKlf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原

BID重組人 BID 蛋白 Protein

ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PILRB Protein Mouse 重組小鼠 PILRB1 蛋白

PLC/PRF/5 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Klf4 (Kruppel likefactor 4 0.5mgKlf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原

ACBD7 Protein Human 重組人 ACBD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

DDR2重組食蟹猴 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白  Protein

PILRB Protein Mouse 重組小鼠 PILRB1 蛋白

BID重組人 BID 蛋白 Protein