細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

EL-4細胞專用培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持EL-4細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含 EL-4 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于EL-4 細胞的培養。

產品主要成分

DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)基礎培養基              445ml

馬血清或者胎牛血清                           50 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

豚鼠膽囊收縮素A受體(CCKAR)試劑盒 ，英文名： CCKAR ELISA Kit

Human cadherln related neuronal receptor 1 (C-1) ELISA Kit 人鈣粘蛋白相關的神經受體1(C-1)試劑盒

rabbitProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 兔子前列腺素E2(PGE2)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforB7-2/sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86

線蟲甲基磺酸甲酯(MMS)誘導突變試劑盒10次

rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit兔子堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)試劑盒規格：96T/48T

小鼠去甲(NE)試劑盒

Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)pcr檢測試劑盒分裝

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4試劑盒豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)試劑盒規格：96T/48T

人周期素依賴性激酶9(CDK-9)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human CDK9 (Cyclin Depende Kinase 9) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human CDKN2A (Cyclin Depende Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit

人軸突生長誘向因子1(n1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human n1 (Nein 1) ELISA Kit

人軸突生長誘向因子4(n4)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human n4 (Nein 4) ELISA Kit

周期素依賴激酶1抗體

艾滋病病毒抗體

CD79B重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein

FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子)(多肽片斷抗原)

CCL17重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白

EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

EL-4 細胞專用培養基FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子)(多肽片斷抗原)

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白

CD79B重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein

EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

CCL17重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein