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當前位置:首頁產品中心科研細胞細胞系NCI-H209 H209 (小細胞肺癌細胞)
NCI-H209 H209 (小細胞肺癌細胞)

產品簡介

NCI-H209 [H209] (小細胞肺癌細胞) 的相關*:細胞AKT蛋白表達比色法定量檢測試劑盒 10/50 次
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產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-26
廠商性質:經銷商
訪問量:411
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品牌其他品牌貨號GOY-01X0391
規格1×10?cells/T25培養瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

NCI-H209 [H209] (小細胞肺癌細胞)

1×10?cells/T25培養瓶

GOY-01X0391

商品介紹:

名稱    NCI-H209 [H209] (小細胞肺癌細胞)  

別稱H209; H-209; NCIH209

種屬人類

年齡(性別)55

組織來源肺;源自轉移部位:骨髓

生長特性懸浮細胞

細胞形態圓形細胞,聚團生長

背景描述NCI-H209細胞由Gazdar·A·F及其同事于1979年從一名小細胞肺癌患者的骨髓轉移灶中分離建立,該骨髓標本的獲取先于患者的治療。NCI-H209細胞是一種典型的小細胞性肺癌細胞,表達較高水平的4種生化標志:神經特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒有擴增;未發現大的結構DNA的異常;NCI-H209細胞合成與正常肺相當量的p53 mRNANCI-H209細胞以聚集體的形式懸浮生長,只有聚集體中的細胞是有活力的,但是細胞活率無法估計,一般培養基中含有大量的細胞碎片。

生物安全等級1

生長培養基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~50-70小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性Yes, forms transplantable tumors with typical SCLC histology in nude mice.

注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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1mL Protease Inhibitors Cocktail for General Use  Protease Inhibitors Cocktail for General Use  常溫保存

1mL 衣溶液,5mg/mL Tunicamycin  Solution 4℃避光保存

2 ug pTagCFP-N pTagCFP-N 低溫運輸,-20℃保存

UVM1添加劑 UVM Supplement1 1ml*5支

1瓶 97-L細胞株 97-L 低溫運輸和保存

1000支 200 μL RNase-free 黃吸頭(袋裝)  常溫

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