細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代角膜上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代角膜上皮細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代角膜上皮細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代角膜上皮細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒

Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重組激活基因1(RAG-1)pcr檢測試劑盒分裝

Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物賴(lysine)含量化學比色法定量試劑盒20次

HumanVitaminB6，VB6ELISAKit人B6(VB6)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)試劑盒 ，英文名： FoxP3 ELISA Kit

Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒

ELISA 小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(mouse GM-CSF) 分裝

CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脫氫酶

通用型N-乙酰轉移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量試劑盒20次

ELISAKitIFN-γ猴γ干擾素

小鼠補體成分5   英文名稱：   Mouse Compleme Compone 5   英文縮寫：   C5

小鼠結締組織生長因子   英文名稱：   Mouse Connective Tissue Growth Factor   英文縮寫：   CTGF

小鼠皮質   英文名稱：   Mouse Coicosterone   英文縮寫：   CO

小鼠肌酐   英文名稱：   Mouse Creatinine   英文縮寫：   CT

PE-Cy5標記人CD62E/CD62P單克隆抗體

環(huán)指蛋白207抗體

CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原

IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein

ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BC

人原代角膜上皮細胞專用培養(yǎng)基DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原

ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白

CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein

C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白

IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein