細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

B16-F10 /OVA細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持B16-F10 /OVA細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 B16-F10 /OVA細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基                    445 mL

特級(jí)胎牛血清                                   50 mL

P/S                   5 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T

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Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISAKit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Hamstermaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISAK倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)10次

MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)試劑盒 ，英文名： ADIPOR2 ELISA Kit

Mouse soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒

MouseGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanhiston-H2bELISAKit人組蛋白H2b

B3比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCollagenaseII大鼠膠原酶II

小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒   小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒、小鼠0酸化蛋白激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒   小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒、小鼠抗核膜糖蛋白210抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒   小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒、小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

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卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體

鋅指蛋白143抗體

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

B16-F10/OVA 細(xì)胞專用培養(yǎng)基CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mgCYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細(xì)胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)

CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

PDGFRA重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein

SERPINA11 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA11 蛋白

CCL21重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein